等温量热滴定技术:(Isothermal Titration Calorimetry,ITC)是一种监测由结合成分的添加而起始的任何化学反应的热力学技术,它已经成为鉴定生物分子间相互作用的首选方法,它通过高灵敏度、高自动化的微量量热仪连续、准确地监测和记录一个变化过程的量热曲线,原位、在线和无损伤地同时提供热力学和动力学信息。
靶标A滴靶标B:
每次反应需要样品量 样品池靶标B 350ul-400ul,滴定针靶标A 100ul。
样品浓度:
如果已知KD值,可根据公式估算(样品池样品浓度=C*KD*N,C值一般在10-100之间实验结果最好)。
如果不清楚KD,可按经验浓度范围进行准备,样品池一般为10uM~10mM,滴定针比样品池浓度一般高10-20倍,建议初始尝试200uM滴20uM。
建议客户提供溶液样品。特殊情况请致咨询。
样品要求
样品纯度应达到90%以上(HPLC),标明准确纯度。纯度越高,实验结果越理想。
样品要澄清无颗粒,可通过离心或微滤处理。
两个样品所用缓冲液需要完全一致,pH差值<0.05,样品避免使用有机溶剂!
样品真空脱气5min或者离心10min(12000rpm)。
MicroCal PEAQ-ITC 设计特点是易于使用和极其灵敏。 更广的亲和力范围,能够分析亲和力从弱到强的结合力,具有优异的可重复性。Microcal PEAQ-ITC分析软件提供了实验设计模拟、大型数据集批量评估和自动化数据质量评定,对照实验自动设定,具有简化的用户界面,能够引导用户轻松快捷地查看最终数据和演示高质置图形。
测量类型 | 亲和力 (KD) 焓变 ∆H 熵变 ∆S 化学结合计量比 (n) |
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样品量 | 280 µL |
样品池容积 | 200 µL |
进样针体积 | 40 µL |
进样体积精度 | < 1% @ 2 µL |
样品处理量 | 每天(8小时计)8-12份 |
样品池材料 | 哈斯特镍基合金 (Hastelloy) |
样品池 | 硬币形,固定式 |
噪音 | 0.15 ncal/s |
温度范围 | 2 °C ~ 80 °C |
温度稳定性 | ± 0.00012°C |
响应时间 | 10秒 |
多重反馈模式 | 是(被动、高增益、低增益) |
注解 |
*MicroCal PEAQ-ITC 仪器响应时间是真实的时间常数。 它是第一次偏离 基线与峰上最大峰高 63% 的点之间的时间间隔。 |
如有问题详询电话: 13965674386 微信:aptamerHF