#核酸适配体筛选专题#一，乳浊液PCR--内含操作视频

核酸适配体（aptamer）是指通过指数富集的配基系统进化技术（Systematicevolution of ligands by exponential enrichment，简称SELEX）筛选分离得到的DNA或者RNA分子，也称为化学抗体。它可以与靶标如蛋白质、金属离子、小分子、多肽甚至整个细胞进行高亲和力和特异性的结合。与传统的抗体相比，核酸适配体具有分子量小，稳定性更好，无批次间差异性，易改造修饰，无免疫原性，制作周期短，可以通过人工合成等优势，免去了动物免疫、饲养、蛋白提取和纯化等一系列流程。这些优点使其在生物医学领域具有广阔的应用前景，因此在基础研究及应用研究领域均呈现了快速发展的趋势。

#核酸适配体筛选专题#二、乳浊液PCR产物快速高效回收及浓缩--内含操作视频

核酸适配体筛选中的乳浊液PCR（emulsion PCR）是利用油包水乳液体系中的微液滴作为反应器进行的PCR扩增体系。近年来乳浊液PCR在生物医学领域的应用越来越广，可以实现在每个微液滴中进行单分子模板的扩增反应，从而避免常规PCR扩增过程中出现的扩增偏好（PCR bias）问题，提升核酸适配体的筛选成功率

#核酸适配体筛选专题#三、长短链法制备ssDNA单链--切胶、碎胶、煮胶（内含操作视频）

核酸适配体筛选过程中，单链制备是非常重要的一步，单链的质量也关乎筛选的成败。

单链制备方法有多种，发表文献里常见的方法有以下几种：

1、Biotin修饰引物后用SA磁珠分离方法；2、长短链法；将反义链加长，需要电泳跑胶分离两条链；3、酶解法：可以使用lambda酶切，成本较低，但是可能出现不完全酶切；4、不对称PCR法：条件不是很好控制。

#核酸适配体筛选专题#五、微量DNA样品透析（含操作小视频）

透析是利用半透膜将小分子和大分子分离的一种技术，已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。在生物大分子的制备过程中，除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。 通常半透膜制成的透析袋作为工具，无法处理微量样品。核酸适配体筛选得到的aptamer文库，如果要保持较高浓度用于下一轮筛选，通常体积大概会在200ul以内，针对这种微量样品的透析，目前的手段比较有限，文章介绍了一种简便的方法和小工具，可以方便的用于微量样品的透析。

#核酸适配体筛选专题#四、单链DNA PAGE煮胶液回收浓缩（含操作视频）

核酸适配体筛选过程中，单链制备是非常重要的一步，单链的质量也关乎筛选的成败。上一个专题我们已经介绍了用长短链方法制备ssDNA的切胶、碎胶、煮胶的步骤。本次专题主要介绍如何将煮沸出来的约2ml包含DNA的溶液浓缩和纯化。

核酸适配体的高通量测序